一、光源
便携式金相显微镜不能采用直射阳光。晴天可用近窗的散射光作光源。也可用日光灯作为光源。而专为金相显微镜照明而制造的聚丝电灯是较好的光源。
在接通电源后，取下目镜，直接向镜筒内观察，并调节聚光镜上的孔径光阑，使其孔径与视野恰好一样大或略小于视野，其目的是使入射光展开的角度与物镜的数值口径(开口率NA)相一致，既可充分发挥该物镜的分辨力，又能把超过该物镜可能接受的多余光挡住，否则能产生干扰．影响清晰度。所以，原则上使用不同的物镜时应相应调节孔径光阑。放回目镜后，通过调节聚光器上的视光阑或调节照明度控制钮，选择最佳的照明效果。
二、标本放置
1．调焦
转动粗调节螺旋，升高镜台(或下降镜筒)、使低倍物镜的前端接近载片，用左眼在目镜上观察，并转动粗调节螺旋，使镜台下降(或镜筒上升)，可看到物像，然后转动细调节螺旋，使物假清晰。
2．换高倍镜
用低倍镜看到物像后，转动标本移动器上的螺旋，选择合适的视野，并把要观察的部位置于视野的中央，转动物镜转换器把高倍镜置镜筒下方。显微镜在设计制造时，都是共焦点的，即低倍镜对焦后，转换高倍镜时一般都能对准焦点，能看到物像，只需转动细准焦螺旋便可使物像清晰。通过调节集光镜上的视光阑或照明度控制钮使获得最佳照明。
由于细菌个体微小，需要用油镜进行观察。
三、滴加镜油
转动粗调节螺旋，使镜台下降(或使镜筒上升) 在染色标本处滴加1－2 滴液体石蜡或香柏油。
1．转换油镜
转动物镜转换器，把油镜置镜筒下方。
2．调焦
转动粗调节螺旋，使镜台上升(或镜筒下降)，让镜头的前端浸入镜油中。操作时要从侧面仔细观察，只能让镜头浸入镜油中紧贴着标本而避免让镜头撞击载玻片，导致玻片和镜头损。然后在目镜下进行观察，并缓慢转动细准焦螺旋使镜台下降(或使镜筒上升)即可看到清晰的物像。
转动细准焦螺旋使镜台下降(或使镜筒上升)时，若油镜已离开油滴，必须重新进行上述调节操作。不得边用左眼在目镜上观察，边转动细准焦螺旋使镜台上升(或镜筒下降)使镜头前端浸入油滴中，这样易使镜头撞击载玻片，损标本和镜头。
四、调节孔径光阑和视光阑
把孔径光阑开到最大，使与油镜的数值口径相配，通过调节视光阑和照明度控制钮选择合适的照明。
转动粗调节螺旋，使镜台下降(或使镜筒上升)，取出染色标本玻片，然后先用擦镜纸接去油镜上的香柏油，再用擦镜纸沾少量二甲苯(不能用酒精)擦去沾在油镜上的镜油，最后用擦镜纸擦净二甲苯及镜油。用液体石蜡作镜油时，可以只用擦镜纸即可擦净，不必用(或仅用极少量)二甲苯。把镜头转成“八”字形，套上镜罩后放入显微镜柜中。 |
